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ELISA試劑盒的溫育反應(yīng)步驟中
更新時(shí)間:2016-07-04   點(diǎn)擊次數(shù):1322次

    目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實(shí)驗(yàn)室使用時(shí)對(duì)所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時(shí)所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。這樣做的目的,所以有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測(cè)定為陽性,下次測(cè)定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。其次,主要是為了在后面,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達(dá)到所要求的高度,以知足測(cè)定要求。

    再如治療藥物的檢測(cè),應(yīng)根據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)選擇服藥后的zui適時(shí)間抽血檢測(cè)。溫育所需時(shí)間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時(shí)間相對(duì)較短。使用微量加樣器加樣必需留意的樞紐點(diǎn)是:ELISA試劑盒加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)氣憤泡。對(duì)用于激素和治療藥物測(cè)定的血清標(biāo)本的收集,要留意收集時(shí)間甚或體位有可能會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響。

    結(jié)果判定和結(jié)果講演及解釋等方面,其中任一步驟的不當(dāng)都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果,且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。濺出會(huì)對(duì)臨近孔產(chǎn)生污染。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等的檢測(cè)的血清標(biāo)本的收集則沒有時(shí)間和體位方面的影響。ELISA試劑盒作為一種固相免疫測(cè)定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相長(zhǎng)進(jìn)行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合,必需在一定的溫度前提下反應(yīng)一定的時(shí)間。 

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