嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值,洗板不正確可以導(dǎo)致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉,避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
動物elisa試劑盒在儲存和溫育時避免強光直接照射,平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
動物elisa試劑盒在保存時也要注意。要留意防止呈現(xiàn)嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的ELISA試劑盒測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育進程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
血清標本如是以無菌操作分離,則能夠在2~8℃下保存一周,ELISA試劑盒如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長期保存,應(yīng)在-70℃以下。標本在保存中如呈現(xiàn)細菌污染所造成的的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉積后取上清檢測。
樣本的收集及血清分離中要留意盡量防止細菌污染,一則細菌的成長,其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應(yīng)酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性攪擾。
冰凍保存的血清標本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。上海猴ELISA試劑盒標本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發(fā)生損壞作用,然后引起假陰性成果。此外,凍融標本的混勻亦應(yīng)留意,不要進行劇烈振動,重復(fù)倒置混勻即可。