更新時間:2024-06-14
來源于 C57BL/6J小鼠的原發(fā)性肝細(xì)胞癌,這些小鼠肝細(xì)胞忠實地代表了肝細(xì)胞癌,并為研究這種類型的肝癌提供了有價值的模型,同義詞HEP-53.4和53.4,它們便于識別和交叉引用,肝細(xì)胞癌是一個重大的健康問題,這些細(xì)胞能夠?qū)ζ浞肿油?、?xì)胞相互作用和治療策略進(jìn)行精確研究,這些細(xì)胞起源于Mus musculus(小鼠),為理解和開發(fā)肝細(xì)胞癌的治療方法提供了相關(guān)的模型系統(tǒng)。
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基本信息
細(xì)胞名稱:HEP-53.4 小鼠肝癌細(xì)胞
細(xì)胞別名:HEP-53.4 ; 53.4 ; 小鼠肝癌細(xì)胞
細(xì)胞來源:德國
細(xì)胞鑒定:STR鑒定已通過
細(xì)胞形態(tài):上皮樣細(xì)胞,貼壁生長
培 養(yǎng) 基:DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)(BasMed-AW-013)+FBS 10% + P/S1%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
凍存條件:無血清凍存液,液氮儲存
細(xì)胞背景:來源于 C57BL/6J小鼠的原發(fā)性肝細(xì)胞癌,這些小鼠肝細(xì)胞忠實地代表了肝細(xì)胞癌,并為研究這種類型的肝癌提供了有價值的模型,同義詞HEP-53.4和53.4,它們便于識別和交叉引用,肝細(xì)胞癌是一個重大的健康問題,這些細(xì)胞能夠?qū)ζ浞肿油?、?xì)胞相互作用和治療策略進(jìn)行精確研究,這些細(xì)胞起源于Mus musculus(小鼠),為理解和開發(fā)肝細(xì)胞癌的治療方法提供了相關(guān)的模型系統(tǒng)。
細(xì)胞用途:僅供科研使用
細(xì)胞貨期:現(xiàn)貨,1周左右
注意事項
1. 常規(guī)消化收集細(xì)胞離心。
2. 離心后去掉離心管內(nèi)上清,加入1ml左右重懸細(xì)胞混勻,建議輕輕晃動或者輕輕吹打細(xì)胞, 放入培養(yǎng)箱消化細(xì)胞,再消化1min左右。
3. 消化好后,用移液槍輕輕吹打細(xì)胞懸液,使細(xì)胞團(tuán)分散,迅速加入3-5ml含血清的培養(yǎng)基混勻以終止消化,離心去除。
4. 加入5ml左右的細(xì)胞相應(yīng)的培養(yǎng)基混勻,按比例接入培養(yǎng)瓶/皿中。
5. 顯微鏡下觀察看細(xì)胞是否成均勻分散的單細(xì)胞,若有少量成團(tuán)的小細(xì)胞團(tuán)可不用重新消化,使之貼壁后待細(xì)胞生長穩(wěn)定后再消散細(xì)胞。
常溫發(fā)貨
收到后T25瓶消毒再放置培養(yǎng)箱靜置2-3小時后觀察密度和狀態(tài)拍照2-3張反饋給銷售,密度達(dá)標(biāo)就可以傳代。前期傳代比例1:2,等再次長滿后傳代時建議凍存其中一整瓶成1個1ml凍存管,另外一瓶繼續(xù)傳代,反復(fù)凍存2-3只后才擴(kuò)增做實驗,以防突發(fā)情況引起斷種。
干冰發(fā)貨常規(guī)細(xì)胞發(fā)貨凍存管2只,復(fù)蘇1只,另外一只備用,第一個復(fù)蘇不成功時嚴(yán)格按照廠家要求復(fù)蘇第二個,均沒有復(fù)蘇成功的情況即時留存復(fù)蘇照片通知我們。
HEP-53.4 小鼠肝癌細(xì)胞
貼壁細(xì)胞
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶/6cm培養(yǎng)皿中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
4. 細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。
5. 運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。
懸浮細(xì)胞
懸浮狀態(tài)下生長的細(xì)胞,可以通過向培養(yǎng)瓶中添加培養(yǎng)基來維持細(xì)胞的生長狀態(tài),一般情況下細(xì)胞密度維持在1×10?~1×10?個/mL(不同細(xì)胞對密度要求不同)可以維持細(xì)胞的正常生長。如需分瓶可以將細(xì)胞懸液收集到離心管中1000rpm,離心5min,棄去上清,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:4的比例進(jìn)行。
運(yùn)輸形式
低溫:1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
常溫: T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
生物安全
1. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。
特別注意
該細(xì)胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培養(yǎng)基中生長良好,大部分的DMEM含有較高濃度的NaHCO3(3.7g/L),若使用DMEM(3.7g/L NaHCO3)培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞時需要提高CO2濃度(7%-10%)。
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